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青島農大成功培育出帶熒光標記的pGH轉基因豬

畜牧家禽網  時間:2010/11/2 15:14:00 來源:青島農大 閱讀數:

  在國家轉基因動物新品種培育重大專項“節糧型高瘦肉率轉基因豬新品種培育”課題的研究中,由我校孫金海教授主持的“轉誘導型生長激素相關基因豬培育” 項目日前取得了突破性進展,首批獲得15頭體內被轉入綠色熒光蛋白基因(EGP)和豬生長激素基因(pGH)轉基因豬。9月26日、9月29日和9月30日,15頭轉基因仔豬在我校豬育種實驗基地順利降生,這種被轉入了綠色熒光蛋白基因的轉基因豬在紫外光源激發下,鼻根部、尾部和蹄部可以觀察到明顯的綠色熒光(見附圖3-5),驗證了轉基因的成功。

  在該項目的研究過程中,得到國家轉基因動物新品種培育重大專項“節糧型高瘦肉率轉基因豬新品種培育”首席科學家、中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所李奎教授,中國農業科學院農業環境與可持續發展研究所崔海信研究員的大力支持。國家轉基因動物新品種培育重大專項“節糧型高瘦肉率轉基因豬新品種培育”于2009年3月23日正式啟動,我校孫金海教授主持“轉誘導型生長激素相關基因豬培育”子課題。

  課題組根據課題時間緊任務重技術難度大的特點,結合我校實際,揚長避短制訂了用納米精子介導法制備轉基因豬方案。經過課題組人員的1年多的科技攻關于今年5月份取得了重要進展,6月初用納米技術處理豬精液后給4頭母豬人工授精,結果4頭母豬全部妊娠。經過113天至118天的妊娠,4頭母豬相繼產仔,共產全仔48頭,其中活仔40頭,畸形2頭,死胎6頭。經基因檢測,有21頭攜帶報告基因(即綠色熒光蛋白基因)和目的基因(即豬生長激素基因),其轉基因效率高達43.75%(顯微注射轉基因和體細胞克隆轉基因的效率目前均為1%左右),是目前國內外轉基因豬制備轉基因效率最高的。目前存活的37頭仔豬中,15頭仔豬經紫外光源下觀察和基因檢測證明攜帶被轉入的綠色熒光蛋白基因(EGP)和豬生長激素基因(pGH),其轉基因有效率高達40.54%。

  從表面看來,這15頭轉基因豬與普通豬沒有區別,但他們體內被轉入了一種特殊外源基因—生長激素基因,能大大縮短生豬的出欄時間。豬生長激素是調節豬正常生長和肌肉發育的主要激素之一,能促進葡萄糖吸收、核酸與蛋白質的合成以及脂肪的分解。經測定這15頭轉基因豬目前的體重為8-12公斤,其中4頭比同窩5頭非轉基因豬的生長速度提高21.74%,6頭比同窩8頭非轉基因豬的生長速度提高11.52%。課題組目前正在集中精力對這15頭轉基因豬的生長發育特點、生理生化指標、飼料轉化率、轉基因豬中外源基因拷貝數、外源基因染色體定位、轉基因的表達水平等進行比較研究。

  據介紹,轉基因技術就是用實驗方法將外源基因導入豬的基因組,使外源基因與豬的基因組進行整合并在豬體內表達的技術。傳統的轉基因技術有顯微注射法、逆轉錄病毒載體法和精子載體法;現代轉基因技術有體細胞克隆轉基因技術、基因打靶技術和慢病毒載體技術。目前國內外用的最多的動物轉基因方法是顯微注射法和體細胞克隆轉基因技術,這兩種方法需要昂貴的儀器設備和經過專門訓練的技術人員。但這兩種方法的轉基因效率非常低均為1-2%左右,這樣低的轉基因效率造成了大量人力、物力資源的浪費,嚴重制約了動物轉基因研究的開展。我校孫金海教授的科研團隊用納米精子載體法制備轉基因獲得成功,而且轉基因效率高達43.75%,其轉基因效率比目前顯微注射法和體細胞克隆轉基因技術提高了幾十倍,其高效的轉基因效率是轉基因方法研究的重大突破。本轉基因方法的建立使轉基因技術更加實用化、簡單化。

  隨著人們生活水平的不斷提高和營養觀念的轉變,人們對豬肉的要求也在不斷提高,尤其是在蛋白質、脂肪含量、風味和口感等方面的遺傳改良。轉基因技術優勢將在豬育種領域發揮不可替代的重要作用。隨著分子生物學技術的不斷發展和新的精子介導法等轉基因方法的不斷完善,轉基因豬的研究和應用前景更加誘人。

  轉基因豬研究簡史

  1985年,世界上第一頭轉基因豬在美國誕生。首例轉基因豬被轉入了生長激素基因,比普通豬生長更快。此后,轉生長激素基因豬在澳大利亞等國相繼誕生。

  1990年,我國首批轉生長激素基因豬在湖北省農科院誕生。此后,多種轉基因豬相繼問世。如有的豬可生產人血清白蛋白;有的豬的心臟因為具有較強的抗排斥反應,而被移植到猴子體內,以換下猴心。

  2002年1月,媒體報道日本近畿大學研究人員把菠菜基因植入豬的受精卵內,培育出不飽和脂肪酸含量高的轉基因豬。

  2006年3月,美國科學家稱他們培育出了轉基因健康豬,這種豬體內含有大量ω-3(歐米伽3)脂肪酸去飽和酶基因。

  2006年底,東北農業大學教授劉忠華帶領的團隊研制出中國首只轉基因“熒光豬”。這種“熒光豬”在紫外線的照射下,身體上會發散出晶瑩的綠光。

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