畜牧家禽網 時間:2011/12/22 13:22:00 來源:城市信報 閱讀數:
消毒、取樣、注水、靜養,這樣嬌貴的培養對象,卻是現在人人喊打的“熒光豬肉”元兇族類——熒光假單胞菌。青島大學生物系主任李榮貴還在熒光假單胞菌的營養液中培育黑松幼苗,結果5天之內黑松幼苗全部枯萎致死。
消毒、取樣、注水、靜養,這樣嬌貴的培養對象,卻是現在人人喊打的“熒光豬肉”元兇族類——熒光假單胞菌。12月20日,信報記者與青島大學生物系聯手實驗發現,熒光假單胞菌有點“嬌生慣養”,30攝氏度是理想的繁殖環境,4攝氏度時它們會停止繁殖。青島大學生物系主任李榮貴還在熒光假單胞菌的營養液中培育黑松幼苗,結果5天之內黑松幼苗全部枯萎致死。
實驗一 24小時揪出“熒光豬肉”元兇族類
“要想研究‘熒光豬肉’的元兇,就得把熒光假單胞菌分離出來。”12月20日,青島大學生物系主任李榮貴介紹說,“我們在實驗室有保留的細菌樣本,樣本都是在低溫下保存的。”記者了解到,大量繁殖熒光假單胞菌,需要消毒、取樣、注水、靜養,一系列的過程都需要在密閉的無菌空間中進行,細菌生長也要無菌,非常嬌貴。
上午10點左右,實驗前,所有的實驗材料被放入工作臺紫外滅菌20分鐘。20分鐘后,實驗室工作人員關掉紫外燈,將封閉的工作臺打開,進入實驗臺后,雙手用酒精棉擦拭,并點燃酒精燈,開始對直接接觸細菌樣品的器具進行消毒。降溫后,工作人員用器具深入樣品試管,把細菌“接”出來。“在此之前,需要在一個小容器中住滿無菌液體,‘接’出來的細菌會被轉移到這個放滿無菌液體的小容器中。”工作人員解釋說。
記者看到,“嬌生慣養”的細菌被“接”到無菌液體中后,工作人員拿起一個類似圓珠筆的器具開始對無菌液體反復地吸入噴出,“要讓細菌樣品在無菌液中分散開,繁殖起來才比較快。”工作人員介紹說。“熒光假單胞菌的生長繁殖需要比較嚴格的生活環境,如果在4攝氏度的時候,細菌可以存活,但生長和繁殖會停止。”工作人員介紹說,“最理想的繁殖生長環境,就是在無菌的條件下,溫度調節在30攝氏度左右。”
“接下來,就要吸取150微升的菌懸液滴于培養基表面,用加熱滅菌的涂布棒將菌懸液均勻地涂布在培養基表面。”專業詞語不斷地從實驗人員嘴里蹦出來,記者連連搖頭。實驗人員連忙給記者解釋:“菌懸液就是那小瓶從剛剛加入細菌的一毫升無菌水,涂布棒是頭上一個三角形的玻璃棒,培養基就是平底的玻璃器皿。”
“明天上午10點左右,我們就可以在這個玻璃器皿中看到一點一點抱團的滿杯細菌了。”工作人員解釋說,“從顯微鏡下看,熒光假單胞菌是柱狀結構,后面會看到幾個絲狀的‘尾巴’。”
實驗結論“熒光豬肉”元兇族類很“脆弱”
12月20日,記者在青島大學生物系采訪到系主任李榮貴。他告訴記者:“就熒光假單胞菌來說,它分為不同的株,也就是不同的種類,我們研究的是熒光假單胞菌GcM5-1A,目前已知的有四五種左右,這些菌種的外形都差不多,但是對于植物、動物影響的程度卻是不一樣的。”
“熒光假單胞菌屬于嗜冷菌,喜歡在冷的環境下生存,這也就意味著,高溫狀態下這種菌就很容易被殺死。”李榮貴說,“但是有研究發現,在北美很少發現因為熒光假單胞菌誘發的植物死亡案例,這是因為熒光假單胞菌需要借植物體內的線蟲來生存繁殖,如果溫度過低,細菌賴以生存的線蟲被凍死了,那么細菌也就自然而然被殺死了。”
“現在人們熱議的‘熒光豬肉’,同樣在高溫下也會殺死熒光假單胞菌,一般來說,水溫達到70攝氏度,細菌就不會存活了。”李榮貴說。
實驗二 放入“熒光豬肉細菌”,黑松幼苗死了
隨后,記者等人還用“熒光豬肉細菌”做了黑松幼苗實驗。“我很多學生都做過黑松實驗,主要是來驗證熒光假單胞菌在黑松感染松萎蔫病中起到的作用。”李榮貴說,之所以選取熒光假單胞菌作為實驗對象,是因為有實驗對造成黑松感染松萎蔫病的線蟲進行過分析,在線蟲身體表面的多種細菌中,熒光假單胞菌對黑松死亡過程中產生的影響*。
“有實驗曾經直接給黑松注射過熒光假單胞菌,但是并沒有直接導致黑松的死亡。”李榮貴分析說,“也就是說,細菌并不能自己對樹木產生威脅,而是在植物一種線蟲的作用下,雙方協作,最終導致的黑松死亡。”
青島大學生物系學生不止一次地做過黑松死亡的實驗,“我們把八株黑松幼苗分別放入不同劑量的清水和熒光假單胞菌液體中,觀察黑松的生長狀態。”李榮貴解釋說,“這個實驗需要把黑松的根部解掉,讓整個幼苗充分吸收清水或者熒光假單胞菌液體,這樣就可以實現細菌和植物體內線蟲的協調配合,讓一些幼苗感染松萎蔫病。”
“多組實驗表明,插入清水的黑松幼苗五天后生長狀態良好,毫無枯萎的跡象,而插入熒光假單胞菌液體中的黑松幼苗,一天天開始枯萎,五天后全部枯萎死亡。”李榮貴介紹說。
實驗結論熒光假單胞菌會釋放致病毒素
“我們現在研究的主要課題就是松萎蔫病,這種疾病是由松材線蟲和其攜帶的致病細菌共同侵入松樹,在松材線蟲提供保護和營養的條件下,由致病細菌分泌毒素導致寄主萎蔫和死亡。松材線蟲在攜帶細菌入侵及入侵后能為其提供營養和保護作用,而細菌在產毒和促進線蟲繁殖等方面起重要作用。”李榮貴介紹說。
李榮貴得出結論,“經過我們多年的研究,課題組已從松材線蟲攜帶的一株高致病性熒光假單胞菌GcM5-1A的培養液中分離了兩種對黑松懸浮培養細胞和黑松切根苗均有明顯致死活性的物質,并通過實驗在發病的黑松枝條內檢測到了這兩種化合物的存在。”
實驗手記人體也有熒光假單胞菌尚未發現對人的負面影響
“目前來說,并沒有發現熒光假單胞菌對人會產生什么樣的負面影響,因為在人的痰、腸道中都可以分解出熒光假單胞菌。”青島大學生物系主任李榮貴介紹說,“但是并不能絕對地說就沒有影響,從嚴格意義上來講,熒光假單胞菌是一種機會性致病菌,這種機會性致病菌的意思也就是說,在一定的條件下,和一些細菌或者物質作用中,會產生一些不利的影響。”
記者看到實驗室工作人員在實驗前后都用消毒液對手進行消毒,考慮到的也是這種因素。“在熒光假單胞菌對動物的影響方面,一些專家也進行過研究,比方說遼寧省淡水水產科學研究院曾經對鯉魚豎鱗病的病原進行過研究。”
“他們在患有豎鱗病鯉魚的鱗囊、肝、腎中分離出病原菌3株,對其中2株進行分類鑒定,分離自病魚鱗囊的菌株為鯰愛德華氏菌,分離自病魚腎臟的菌株為熒光假單胞菌。”青島大學生物系主任李榮貴介紹說。