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　　5、免疫學(xué)診斷

　　免疫學(xué)診斷是傳染病診斷和檢疫中常用的重要方法，包括血清學(xué)試驗和變態(tài)反應(yīng)兩類。

　　1.血清學(xué)試驗：利用抗原和抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)反應(yīng)進(jìn)行診斷。可以用已知抗原來測定被檢動物血清中的特異性抗體，也可以用已知的抗體（免疫血清）來測定被檢材料中的抗原。血清學(xué)試驗有中和試驗、凝集試驗（直接凝集試驗、間接凝集試驗、間接血凝試驗、SPA協(xié)同凝集試驗和血細(xì)胞凝集抑制試驗）、沉淀試驗（環(huán)狀沉淀試驗、瓊脂擴(kuò)散沉淀試驗和免疫電泳等）、溶細(xì)胞試驗（溶菌試驗、溶血試驗）、補(bǔ)體結(jié)合試驗以及免疫熒光試驗、免疫酶技術(shù)、放射免疫測定、單克隆抗體和核酸探針等。近年來由于與現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)相結(jié)合，血清學(xué)試驗在方法上日新月異，發(fā)展很快，其應(yīng)用也越來越廣，已成為傳染病快速診斷的重要工具。

　　2.變態(tài)反應(yīng)：豬患某些慢性傳染病時，可對該病病原體或其產(chǎn)物的再次進(jìn)入產(chǎn)生強(qiáng)烈反應(yīng)。能引起變態(tài)反應(yīng)的物質(zhì)（病原體、病原體產(chǎn)物或抽提物）稱為變態(tài)原，如結(jié)核菌素，將其注入患病動物時，可引起局部或全身反應(yīng)。

　　6、分子生物學(xué)診斷

　　分子生物學(xué)診斷又稱基因診斷。主要是針對不同病原微生物所具有的特異性核酸序列和結(jié)構(gòu)進(jìn)行測定。自1976年以來，基因診斷方法取得巨大進(jìn)展。建立了DNA限制性內(nèi)切酶圖譜分析，核酸電泳圖譜分析。寡核苷酸指紋圖、核酸探針、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、Western雜交以及新近幾年發(fā)展起來的DNA芯片技術(shù)等。在傳染病診斷方面，具有代表性的技術(shù)主要有三大類：核酸探針、PCR技術(shù)和DNA芯片技術(shù)。

　　1.PCR技術(shù)：又稱為體外基因擴(kuò)增技術(shù)。PCR技術(shù)主要是檢測病原，用于傳染病的早期診斷和傳染源的鑒定。傳染病的病原體主要有真核生物、原核生物和非細(xì)胞型生物（病毒、朊病毒等）三大類。每類病原體都有其特異性的核酸。檢測出特異性核酸就能確定致病的微生物，就能確診是哪種傳染病。

　　2.核酸探針技術(shù)：核酸探針又稱為基因探針、核酸分子雜交技術(shù)。該方法有三大組成部分：⑴待檢核酸（模板）；⑵固相載體（NC硝酸纖維膜或尼龍膜）；⑶用同位素、酶、熒光標(biāo)記的核酸探針。探針診斷應(yīng)用范圍：⑴可對病毒、細(xì)菌、支原體、立克次氏體、寄生蟲、原蟲等致病原都能做出快速準(zhǔn)確診斷。⑵在混有大量雜菌或混合感染物中直接檢出主要致病原。包括難以在體外培養(yǎng)的病原。⑶檢出帶菌、帶毒隱性感染的動物。⑷可對病原微生物進(jìn)行準(zhǔn)確分類鑒定。⑸可對動物產(chǎn)品或食品進(jìn)行衛(wèi)生檢驗。

　　3.DNA芯片技術(shù)：科研人員正在研究該項技術(shù)在動物傳染病的診斷上的應(yīng)用。DNA芯片技術(shù)是在核酸雜交、測序的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，與Southern雜交、Northern雜交同出一個原理，即DNA堿基配對和序列互補(bǔ)原理。目前已有篩選檢測HIV病毒蛋白酶基因和反轉(zhuǎn)錄酶基因突變的DNA芯片商品。金黃色葡萄球菌、白色念球菌DNA芯片也已問世。