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一、母種、原種、栽培種的制作過程
1.母種:母種也就是一級菌種,它的制作大致經(jīng)過以下幾個過程:培養(yǎng)基配制→培養(yǎng)基滅菌→子實體分離或菇木分離或孢子分離→培養(yǎng)→轉管純化培養(yǎng)→母種。
?、倌阜N培養(yǎng)基配制。應根據(jù)不同食用菌的不同營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。常用的配方有:配方1:土豆葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(簡稱PDA培養(yǎng)基):土豆(即馬鈴薯)200克、葡萄糖20克、瓊脂(凝固劑)20克;配方2:土豆蔗糖瓊脂培養(yǎng)基(PSA培養(yǎng)基):土豆200克、瓊脂20克、水1000毫升、蔗糖20克;配方3:土豆胡蘿卜瓊脂培養(yǎng)基(PCA培養(yǎng)基):土豆20克、胡蘿卜25克、瓊脂20克、水1000毫升;配方4:土豆瓊脂培養(yǎng)基(PA培養(yǎng)基):土豆250--300克、瓊脂20克、水1000毫升。②母種分離。即通常將食用菌的子實體、土壤中的菌根、菌素分離或進行菇木分離或擔孢子分離,然后在培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到母種。③母種擴大培養(yǎng)。用上述方法得到的母種數(shù)量有限,往往不能滿足生產上的需要,因而需要通過接種來擴繁一批母種供生產用。
2.原種:原種也叫二級菌種,是由母種接種到瓶子或塑料袋里,經(jīng)培養(yǎng)后得到的菌種。制作原種的目的,一是為了擴大種量,滿足生產上的需要;二是讓菌絲對各種秸稈類物質具有適應能力,并在適應的同時產生各種酶類;三是在培養(yǎng)過程中還可以對菌種的生命力、純度等進行檢驗,存優(yōu)棄劣。通過接種,一支母種可擴接3--5瓶原種。
簡要介紹幾種原種培養(yǎng)基配方:①鋸末培養(yǎng)基:鋸末(闊葉樹)78%、米糖(或麥麩)20%、糖(紅糖或白糖,下同)1%、石膏粉1%,水適量;②棉子殼培養(yǎng)基:棉子殼78%、麥麩或米糠20%、石膏粉1%、糖1%,水適量;③鋸末玉米粉培養(yǎng)基;鋸末(闊葉樹)90%、玉米粉8%、糖1%、石膏粉1%,水適量;④稻草段培養(yǎng)基:稻草段78%、米糠或麩皮20%、石膏粉1%、糖1%; ⑤鋸末、棉子殼混合培養(yǎng)基:鋸末40%、棉子殼40%、麥麩18%、石膏粉1%、糖1%,水適量;⑥酒糟培養(yǎng)基:干酒糟40%、棉子殼(或鋸末)40%、麥麩18%、石灰1%、糖1%,水適量。
3.栽培種:栽培種是直接用于生產栽培的菌種,也叫三級菌種或生產種。栽培種比原種的需要量更大,所用的培養(yǎng)基配方和制作方法與原種相同,將發(fā)滿瓶的原種,接種到栽培種瓶子或薄膜袋里即可得到栽培種。一般每瓶原種可擴接60--100瓶栽培種。
二、菌種生產所需的條件
1.無菌室:無菌室一般不宜過大,4--6平方米即可。與無菌室相連還應有一個1--2平方米的緩沖室相配套??捎盟幤坊蜃贤鉄魧ζ錃⒕尽?/p>
2.無菌箱:也叫接種箱。大小和規(guī)格依具體條件而定,有單人式、雙人式、4人式等。一般雙人操作式較為普遍。農村專業(yè)戶可以制作一個單人操作式。
3.接種工具:常用的接種工具有酒精燈、接種器等。接種器包括接種鏟、接種勺、接種鉤等。
4.藥品:①酒精。除供酒精燈燃燒用外,主要用于手、接種器的消毒。②甲醛。一般配成37%的溶液即福爾馬林用于接種箱的消毒。③石碳酸,也叫苯酚,常用5%的水溶液進行接種箱和無菌室的噴霧消毒,或配成0.5%--1%的溶液,用于洗涮器皿、桌面和工作服,以達到消毒目的。④漂白粉。常用10克漂白粉加水140毫升,靜止1--2小時后取上清液,用噴霧消毒無菌室。⑤新潔爾滅。常用0.25%濃度溶液進行皮膚和不能以高壓滅菌的器具的消毒,也可用于接種箱和無菌室的噴霧消毒。
三、消毒與滅菌
因為自然界里到處有微生物的存在,如空氣、所有原料、水以及一切用具和器具的表面,這些微生物對食用菌菌種而言,都屬于有害菌,即通常所說的雜菌。我們制作的菌種,要求絕對不能染上雜菌,所以必須進行嚴格滅菌。
1.加熱滅菌法:普遍使用的一種方法是常壓一次滅菌法,所需設備簡單、投資少、成本低,適合我國農村使用。此法只要砌一個鍋灶,買一口大鍋,做幾個蒸籠就可以了。把待殺菌的物品放入蒸籠里,從上氣開始,保持蒸煮6--8小時,即可達到滅菌的目的。
2.紫外線滅菌法:開紫外燈30--40分鐘,基本上可達殺菌目的,距照射物的距離以不超過1.2米為宜。注意紫外線對人體有傷害作用,所以不能用眼睛直視開著的紫外線燈,也不能開著燈工作。
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