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柑桔黃龍病病原培養及免疫診斷

畜牧家禽網  來源:互聯網 閱讀數:

  該技術針對柑桔的毀滅性病害黃龍病,對黃龍病類細菌進行分離培養,研制半合成培養基的配方,制定了從病葉葉脈分離 BLO的培養方法,建立了BLO分離培養技術。用人工培養的 BLO活菌或 BLO蛋白免疫小鼠(或家兔)制得單克隆抗體及免疫血清,并創立了下列4種免疫診斷方法:①酶聯免疫吸附分析法(ELISA),即用辣根過氧化物酶標記單克隆抗體,以聯苯二胺為顯色劑,將柑桔葉子的勻漿作材料,3天內可得正確結果;②酶標免疫定位法,即用辣根過氧化物酶標記單克隆抗體,以聯苯二胺為顯色劑,將柑桔葉子的葉脈徒手切片作材料,此法為定性分析, l.5天內可得結果;②熒光抗體檢驗法,即用培養病原的免疫血清或單克隆抗體作第一抗體,以異硫氰熒光素(FITC)標記的IgG(羊抗鼠或羊抗兔)作第二抗體,將柑桔葉子的葉脈作徒手切片為材料,此法屬定性分析方法;④膠體金一銀標記免疫檢測法,即用膠體金標記免疫血清或單克隆抗體,以硝酸銀作染色劑,將柑桔葉子的葉脈徒手切片作材料,也屬定性分析方法,在6小時內完成檢測。上述技術實現了柑桔發病前的預知診斷,防止了病害流行,提高了果樹的生產能力。

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